Диагностика антифосфолипидного синдрома достаточно сложна, поскольку ни одна лабораторная методика, взятая в отдельности, не обеспечивает сколько-нибудь надежного распознавания АФС, ведет либо к гипер-, либо, наоборот, к гиподиагностике указанной патологии.

Таким образом, антифосфолипидный синдром верифицируется и классифицируется:

на основании характерных клинических проявлений (см приложение 17);
по выявлению эффектов волчаночного антикоагулянта;
по результатам иммунных определений

В соответствии с рекомендациями субкомитета по АФС/ВА Комитета по стандартизации Международной ассоциации по тромбозу и гемостазу (2000, 2002) для определения ВА используется трехэтапная схема диагностики, включающая следующие определения на бедной тромбоцитами плазме - БТП:

Скрининговые фосфолипидчувствительные тесты

Активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ).
Тест с разведенным ядом гадюки Рассела (со скрининговым реагентом).
Тест ингибирования разведенного тканевого тромбопластина.
Каолиновое время свертывания бедной тромбоцитами плазмы.

Тест на смешивание плазмы больного с контрольной нормальной плазмой для исключения дефицита факторов свертывания (при наличии гипокоагуляции)

1. АПТВ.

Тесты коррекции имеющейся гипокоагуляции фосфолипидами

Для исключения действия других иммунных ингибиторов к факторам свертывания (высокая концентрация фосфолипидов в тест-системе).

Лизат тромбоцитов.
Микровезикулы, полученные из тромбоцитов.
Фосфолипидные липосомы.
Гексагональные фосфолипиды.

Подтверждающие тесты на ВА (низкая концентрация фосфолипидов в тест-системе)

Тест с разведенным ядом гадюки Рассела (со специальным реагентом).
Тест нейтрализации тромбоцитами.
Тест с гексагональными фосфолипидами.

Характерная для наличия ВА выраженность гипокоагуляции в плазме больного (в сравнении с показателем теста в контрольной нормальной плазме) в группе скрининговых фосфолипид-чувствительных проб – 20% (для каолинового времени БТП – 25%) и выше. Купирование гипокоагуляции в последней группе подтверждающих тестов диагностически значимо для верификации ВА в тех случаях, когда определяется как минимум в двух тестах и наблюдается на протяжении 3 недель.

Ниже приводится алгоритм выявления волчаночного антикоагулянта на основе упрощенной, предложенной в Алтайскои гематологическом центре схемы, базирующейся на сочетанном применении противовесных тестов.

I. Скрининговые и противовесные тесты

АПТВ (ВА+)	С разведенным ядом гюрзы (лебетоксовый) ^[1] [50]	Протромбиновый с разведенным тромбопластином (ВА+)
АПТВ (ВА-)	С разведенным ядом эфы (эхитоксовый) ^[2]	Протромбиновый с разведенным тромбопластином (ВА-)

II. Коррекционные (подтверждающие) тесты

Коррекция компенсирующими фосфолипидами (тромбоцитином, эритрофосфатидом и др.)

Коррекция бедной тромбоцитами плазмой (БТП)

Схема. Алгоритм определения волчаночного антикоагулянта на основе применения противовесных люпус-чувствительных и люпус-нечувствительных тестов (наборы реагентов «Люпус-тест», «Экспресс-Люпус-тест», фирма «Технология-Стандарт»).

В ходе исследований на I этапе сравнивают результаты тестов, выполненных с реагентами, чувствительными (АПТВ ВА+, протромбиновый тест ВА+, проба с ядом гюрзы или лебетоксом) и малочувствительными к действию ВА (АПТВ ВА-, протромбиновый тест ВА-, проба с ядом эфы или эхитоксом).

Различие показаний в этих противовесных тестах, обязательное для присутствия в плазме ВА, практически не выявляется при других причинах удлинения гемокоагуляции, в том числе при дефиците каких-либо факторов свертывания, наличии их ингибиторов и крайне мало значимо при лечении антикоагулянтами (гепаринами и антагонистами витамина К). Именно с этим условием и были подобраны парные реагенты.

При получении положительных результатов на I этапе скрининга возможно выполнение коррекционных (подтверждающих) тестов в тест-системах, использующих ВА+ реагенты (II этап).

Чувствительность диагностического алгоритма определения ВА для верификации антифосфолипидного синдрома составляет около 70-80%. В течение жизни, особенно при беременности, он может персистировать в крови, что оправдывает проведение повторных исследований, при наличии клинических предпосылок, спустя месяц или больший промежуток времени.

^[1] Аналог яда гадюки Расселла
^[2] Аналог экарина